Вивчення Са2+-індукованих змін мембранного потенціалу мітохондрій міометрія з використанням методу протокової цитометрії
eNUFTIR
Переглянути архів Інформація| Поле | Співвідношення | |
| Title |
Вивчення Са2+-індукованих змін мембранного потенціалу мітохондрій міометрія з використанням методу протокової цитометрії
Изучение Са2+-индуцированных изменений мембранного потенциала митохондрий гладких мышц с использованием метода проточной цитометрии Investigation of Ca2+-induced changes of membrane potential of smooth muscle mitochondria using flow cytometric analysis |
|
| Creator |
Бабіч, Л. Г.
Шликов, С. Г. Наумова (Кандаурова), Н. В. Костерін, С. О. Бабич, Л. Г. Шлыков, С. Г. Наумова (Кандаурова), Н. В. Костерин, С. А. Babich, L. Shlykov, S. Naumova (Kandaurova), N. Kosterin, S. |
|
| Subject |
протокова цитометрія
проточная цитометрия flow cytometry ізольовані мітохондрії мембранний потенціал Са2+ гладенькі м’язи изолированные митохондрии мембранный потенциал Са2+ гладкие мышцы isolated mitochondria membrane potential Ca2+ smooth muscles |
|
| Description |
Застосовуючи метод протокової цитометрії та потенціалчутливий флуоресцентний зонд TMRM, досліджували Са2+-індуковані зміни мембранного потенціалу в ізольованих мітохондріях міометрія. Додавання Са2+ (100 мкМ) до середовища інкубації індукує деполяризацію мітохондріальної мембрани, що, ймовірно, обумовлюється активацією Са2+/Н+-обмінника, функціонування якого спричинює дисипацію мембранного потенціалу. За наявності в середовищі інкубації 10 мкМ рутенієвого червоного (інгібітору електрофоретичної акумуляції іонів Са в мітохондріях) і 100 мкМ Са2+ дисипації мембранного потенціалу не виявлено. Отже, розсіювання потенціалу, вірогідно, пов’язано зі збільшенням концентрації кальцію в матриксі. За наявності Mg2+ (3 мМ) і АТР (3 мМ) додавання до середовища інкубації 100 мкМ Са2+ не зумовлює мембранної деполяризації. Це, ймовірно, пояснюється функціонуванням АТР-синтетази у зворотному напрямку як Н+-помпи, що запобігає дисипації мембранного потеціалу мітохондрій. Таким чином, метод протокового цитометричного аналізу дає змогу досліджувати мембранний потенціал в ізольованих мітохондріях гладенького м’яза матки, а також проводити скринінг ефекторів, які здатні модулювати цей параметр.
С использованием метода проточной цитометрии и потенциалчувствительного флуоресцентного зонда TMRM исследованы Са2+-индуцированные изменения мембранного потенциала изолированных митохондрий миометрия. Показано, что добавление 100 мкМ Са2+ в среду инкубации сопровождается деполяризацией митохондриальной мембраны. Это, возможно, объясняется активацией Са2+/ Н+-обменника, функционирование которого приводит к диссипации мембранного потенциала. При предварительном внесении в среду инкубации 10 мкМ рутениевого красного (ингибитора электрофоретической аккумуляции ионов Са в митохондриях), а также 100 мкМ Са2+ диссипация мембранного потенциала не происходит. Следовательно, диссипация мембранного потенциала действительно обусловлена увеличением концентрации Са2+ в матриксе. При наличии в среде инкубации Mg2+ (3 мМ) и АТР (3 мМ) внесение в нее 100 мкМ Са2+ не сопровождается деполяризацией, что, возможно, объясняется функционированием АТР-синтетазы в обратном направлении как Н+-помпы, что, вероятно, предотвращает диссипацию потенциала митохондрий. Таким образом, метод проточной цитометрии позволяет регистрировать мембранный потенциал изолированных митохондрий гладких мышц, а также проводить скрининг эфекторов, способных модулировать этот параметр. Using flow cytometric analysis and potential-sensitive fluorescent dye TMRM Ca2+-induced changes of membrane potential of isolated smooth muscle mitochondria were studied. It was shown, that Ca2+ (100 μM) addition to the incubation medium induced mitochondrial membrane depolarization that probably could be explained by Са2+/Н+-exchanger activation which functioning lead to membrane potential dissipation. In the case of ruthenium red (10 μM) preliminary presence in incubation medium, Ca2+ (100 μM) addition did not lead to membrane potential dissipation. Hence, membrane potential dissipation was caused by an increase of matrix Ca2+ concentration. In the presence of Mg2+ (3 mM) and ATP (3 mM), Ca2+ addition did not cause depolarization. It was supposed that in this case ATP synthase acted in the opposite direction as Н+-pump and prevented from mitochondrial membrane potential dissipation. Thus, the flow cytometry method allows to register membrane potential of isolated smooth muscle mitochondria and also to test the effectors, capable to modulate this parameter. |
|
| Date |
2012-11-13T09:17:38Z
2012-11-13T09:17:38Z 2007 |
|
| Type |
Article
|
|
| Identifier |
Вивчення Са2+-індукованих змін мембранного потенціалу мітохондрій міометрія з використанням методу протокової цитометрії, Бабіч Л.Г., Шликов С.Г., Наумова (Кандаурова) Н.В., Костерін С.О.,Укр. біохім. журн. – 2007. – Т. 79, № 6. – С. 34-41.
http://dspace.nuft.edu.ua/jspui/handle/123456789/3650 |
|
| Language |
other
|
|