Сравнение эффективности использования раннего и позднего промоторов фага Т7 для экспрессии гена β-галактозидазы в Escherichia coli
Vernadsky National Library of Ukraine
Переглянути архів Інформація| Поле | Співвідношення | |
| Title |
Сравнение эффективности использования раннего и позднего промоторов фага Т7 для экспрессии гена β-галактозидазы в Escherichia coli
|
|
| Creator |
Глушакова, Л.Г.
Романовская, О.Р. Кордюм, В.А. |
|
| Subject |
Краткие сообщения
|
|
| Description |
Создана модельная система, позволяющая сравнить эффективность использования раннего и позднего промоторов фага Т7 для экспрессии beta-галактозидазного гена Е. coli. Избрана следующая стратегия конструирования. Ген PHК-полимеразы фага Т7 клонирован в составе ДНК векторного фага lambda, Модельный ген z lас-оперона Е. coli (EcoRI-Sal1-фрагмент pLZ56) клонирован в составе ДНК коммерческой плазмиды GEM-I фирмы «Promega» (USA), содержащей поздний промотор фага Т7. В клонироанном фрагменте сохранены сайты связывания с рибосомами и промотор А3, ранний промотор фага Т7, специфичный для РНК-полимеразы Е. coli. Приведены закономерности синтеза β-галактозидазы при транскрипции z-гена как с позднего промотора фага Т7, так и с промотора А3.
Створено модельну систему, що дозволяє порівняти ефективність використання раннього і пізнього промоторів фага Т7 для експресії beta-галактозидазного гена Е. coli. Обрано наступну стратегію конструювання. Ген PHК-полімерази фага Т7 клоновано у складі ДНК векторного фага lambda, Модельний ген lасz-оперону Е. coli (EcoRI-Sal1-фрагмент pLZ56) клоновано у складі ДНК комерційної плазміди GEM-I фірми «Promega» (USA), що містить пізній промотор фага Т7. У клонованому фрагменті збережені сайти зв'язування з рибосомами і промотор А3, ранній промотор фага Т7, специфічний для РНК- полімерази Е. coli. Наведено закономірності синтезу β-галактозидази при транскрипції z-гена як з пізнього промотора фага Т7, так і з промотора А3. The model system for comparison of the efficiency of use of early and late promoters of T7 phage for the β-galactosidase gene expression has been constructed. The following strategy of construction has been chosen. The gene of T7 phage RNA-polymerase has been inserted into DNA of phage cloning vector. The model gene z of lac operon of E. coli (EcoRI-Sall digest of pLZ56) has been inserted into DNA of plasmid GEM-1 (firm «Promega») which contains phage T7 late promoter. The cloned pLZ56 fragment of DNA contains also S-D sites and A3 promoter specifically recognized by E. coli RNA-polymerase. Some features of b-galactosidase synthesis during transcription of the z gene under the control of the late promoter of phage T7 and under the control of A3 promoter are shown. |
|
| Date |
2019-06-13T11:12:16Z
2019-06-13T11:12:16Z 1990 |
|
| Type |
Article
|
|
| Identifier |
Сравнение эффективности использования раннего и позднего промоторов фага Т7 для экспрессии гена β-галактозидазы в Escherichia coli / Л.Г. Глушакова, О.Р. Романовская, В.А. Кордюм // Биополимеры и клетка. — 1990. — Т. 6, № 1. — С. 100-103. — Бібліогр.: 11 назв. — рос.
0233-7657 DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.000250 http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/152951 577.023 |
|
| Language |
ru
|
|
| Relation |
Биополимеры и клетка
|
|
| Publisher |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
|
|