Конструирование гибридных генов lacZ для изучения механизмов регуляции экспрессии генов rpljl-оперона Escherichia coli
Vernadsky National Library of Ukraine
Переглянути архів ІнформаціяПоле | Співвідношення | |
Title |
Конструирование гибридных генов lacZ для изучения механизмов регуляции экспрессии генов rpljl-оперона Escherichia coli
|
|
Creator |
Крупская, И.В.
Живолуп, А.Н. Патон, Е.Б. |
|
Subject |
Генно-инженерная биотехнология
|
|
Description |
С использованием в качестве векторной плазмиды pNM481 было проведено слияние 5'-концевых фрагментов генов rplJ и rplL с геном IacZ и сравнение уровней активности бета-галактозидазы, обеспечиваемых присутствием в клетках гибридных генов rpl J'-lacZ и rplL'-lacZ. Не обнаружено влияния промотора Pl12 на эффективность экспрессии гена rplL'-lacZ. Уровень активности бета-галактозидазы, кодируемой rplL'-lacZ, во всех случаях превосходит активность, обеспечиваемую rplJ'-lacZ. В отличие от rplJ'-lacZ с увеличением длины фрагмента rplL активность кодируемой им бета-галактозидазы не уменьшалась. Транскрипция гибридных генов с промотора Pbeta сохранила превосходство уровня экспрессии rplL'-lacZ. Предполагается, что регуляция активности генов rplJL oneрона Е. coli, обеспечивающая избыточный синтез белка L7/L12, может осуществляться на уровне трансляции бицистронной мРНК rplJL.
З використанням як векторної плазміди pNM481 проведено злиття 5' -кінцевих фрагментів генів rplJ і rplL з геном lacZ і порівняння рівнів активності бета-галактозидази, забезпечуваних присутністю в клітинах гібридних генів rpl J'-lacZ і rplL'-lacZ. Не виявлено впливу промотору Pl12 на ефективність експресії гена rplL'-lacZ. Рівень активності бета-галактозидази, кодованої rplL'-lacZ, у всіх випадках перевищує активність, забезпечувану rplJ'-lacZ. На відміну від rplJ'-lacZ із збільшенням довжини фрагмента rplL активність кодованої їм бета- галактозидази не зменшується. Транскрипція гібридних генів з промотору Pbeta зберігає перевагу рівня експресії rplL'-lacZ. Передбачається, що регулювання активності генів rplJL-oneрону Е. coli, яке забезпечує надлишковий синтез білка L7/L12, може здійснюватися на рівні трансляції біцістронной мРНК rplJL. Using the pNM481 plasmid vector 5'-terminal fragments of rplJ and rplL genes were fused in-frame to gene lacZ. Hybrid p-alactosidases activity, encoded by genes rplJ'— lacZ and rplL'-lacZ was compared. In contrast to rplL'-lacZ, extension of rplJ fused portion resulted in the decrease of the p-gal activity level. Different efficiency of translations seems to be the most probable mechanism, providing the excess synthesis of r-protein L7/L12 in vivo. |
|
Date |
2019-06-13T11:09:47Z
2019-06-13T11:09:47Z 1990 |
|
Type |
Article
|
|
Identifier |
Конструирование гибридных генов lacZ для изучения механизмов регуляции экспрессии генов rpljl-оперона Escherichia coli / И.В. Крупская, А.Н. Живолуп, Е.Б. Патон // Биополимеры и клетка. — 1990. — Т. 6, № 2. — С. 91-100. — Бібліогр.: 30 назв. — рос.
0233-7657 DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.000262 http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/152949 577.21 |
|
Language |
ru
|
|
Relation |
Биополимеры и клетка
|
|
Publisher |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
|
|