Іммобілізовані одноланцюгові антитіла для афінного очищення рекомбінантного інтерферону α2b людини
Vernadsky National Library of Ukraine
Переглянути архів Інформація| Поле | Співвідношення | |
| Title |
Іммобілізовані одноланцюгові антитіла для афінного очищення рекомбінантного інтерферону α2b людини
|
|
| Creator |
Гільчук, П.В.
Окунєв, О.В. Іродов, Д.М. Павлова, М.В. Яковенко, О.Я. |
|
| Subject |
Молекулярна та клітинна біотехнології
|
|
| Description |
Представлено лабораторний метод отримання афінного імуносорбенту для хроматографічного очищення білків, який полягає в орієнтованій і нековалентній іммобілізації рекомбінантних фрагментів антитіл на целюлозному носії. На основі ДНК-послідовностей одноланцюгових антитіл (ScFv) до інтерферону IFN-α2b людини і целюлозозв'язувального домену (CBD) із целюлозолітичного комплексу Clostridium thermocellum сконструйовано злитий білок (ScFv-CBD). Після експресії гена ScFv-CBD в Escherichia coli і виділення цільового білка у функціонально активній формі здійснено його пряму іммобілізацію на мікрогранулярній целюлозі Целюлозу з іммобілізованим ScFv-CBD використано як афінний сорбент для очищення рекомбінантного IFN-α2b людини.
A laboratory method for obtaining immunoaffine media for chromatographic purification of proteins based on orienting and non-covalent immobilization of recombinant antibody fragments on cellulose matrix is described. The single-chain antibody (ScFv) against human IFN-α2b was genetically fused to cellulose-binding domain (CBD) from cellulosome complex of Clostridium thermocellum and expressed in Escherichia coli. After the isolation of the target protein in functionally active form from bacteria cells the directed immobilization on microgranular cellulose has been carried out. The cellulose with immobilized ScFv-CBD-fusion was used as affinity medium to perform the purifications of recombinant human IFN-α2b Представлен лабораторный метод получения иммуноаффинного сорбента для хроматографической очистки белков, основанный на ориентированной и нековалентной иммобилизации рекомбинантных фрагментов антител на целлюлозном носителе. На основе ДНК-последовательностей однонитчатых антител (ScFv) к IFN-α2b человека и связывающего целлюлозу домена (CBD) из целлюлозолитического комплекса Clostridium thermocellum сконструирован слитый белок (ScFv-CBD). После экспрессии ScFv-CBD в клетках Escherichia coli и выделения целевого белка в функционально активной форме проведена его прямая иммобилизация на микрогранулированной целлюлозе. Целлюлоза с иммобилизованным ScFv-CBD использована как аффинный сорбент для очистки рекомбинантного IFN-α2b человека. |
|
| Date |
2019-06-18T14:34:36Z
2019-06-18T14:34:36Z 2006 |
|
| Type |
Article
|
|
| Identifier |
Іммобілізовані одноланцюгові антитіла для афінного очищення рекомбінантного інтерферону α2b людини / П.В. Гільчук, О.В. Окунєв, Д.М. Іродов, М.В. Павлова, О.Я. Яковенко // Біополімери і клітина. — 2006. — Т. 22, № 2. — С. 157-161. — Бібліогр.: 12 назв. — укр., англ
0233-7657 DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.00072B http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/156478 579.69 + 577.112 + 543.544.17 |
|
| Language |
uk
|
|
| Relation |
Біополімери і клітина
|
|
| Publisher |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
|
|