Transient gene expression and total flavonoids production in the electroporated licorice Glycyrrhiza glabra L. suspension protoplasts
Vernadsky National Library of Ukraine
Переглянути архів Інформація| Поле | Співвідношення | |
| Title |
Transient gene expression and total flavonoids production in the electroporated licorice Glycyrrhiza glabra L. suspension protoplasts
|
|
| Creator |
Kovalenko, P.G.
|
|
| Subject |
Молекулярна та клітинна біотехнології
|
|
| Description |
The bacterial chloramphenicol acetyltransferase (CAT) gene was expressed in licorice G. glabra L. suspension protoplasts by electroporation after introduction of the chimeric plasmid pDNt23-CaMV35S-nos-cat (pDNt23-root-specific and CaMV 35S promoters, nopaline synthase nos-terminator, and selectable NPT-II gene). Maximum of CAT activity in the licorice protoplasts was observed in 50 h after electroporation. Together with recent advances in the cell isolation and electroporation procedures, this system allows to study expression of the root-specific promoter introduced into the licorice cells. The level of total flavonoids production in 4 weeks culture was tested in the electroporated cell lines. Additionally, these electroporated cells were treated by elicitors (yeast extract and fungal bioextract). The total flavonoids production increased by 2–5 times in comparison with the non-electroporated licorice cells.
Суспензійні протопласти солодцю Glycyrrhiza glabra L. трансформували химерною плазмідою pDNt23-CaMV35S-nos методом електропорації, для чого було підібрано оптимальні параметри цього процесу. Експресію підтверджували за допомогою репортерного гена хлорамфеніколацетилтрансферази (CAT). Максимальна його активність у трансформованих клітинах солодки спостерігалася через 50 год. Отримані трансформовані клітинні лінії продовжували культивувати протягом місяця для визначення сумарної фракції флавоноїдів. Трансформовані клітинні агрегати солодцю додатково обробляли біотичними еліситорами. Вміст флавоноїдів в оброблених клітинних агрегатах у 2–5 разів перевищував контроль Суспензионные протопласты солодки G. glabra L. трансформировали методом электропорации химерной плазмидой pDNt23-CaMV35S-nos, для чего были подобраны оптимальные параметры этого процесса. Экспрессию подтверждали с помощью репортерного гена хлорамфениколацетилтрансферазы (CAT). Максимальная его активность в трансформированных клетках солодки наблюдалась спустя 50 ч. Полученные трансфорированные клеточные линии продолжали культивировать в течение месяца для определения суммарной фракции флавоноидов. Трансформированные клеточные агрегаты солодки до полнительно обрабатывали биотическими элиситорами. Содержание флавоноидов в обработанных агрегатах в 2–5 раз превышало контроль. |
|
| Date |
2019-06-22T05:33:04Z
2019-06-22T05:33:04Z 2004 |
|
| Type |
Article
|
|
| Identifier |
Transient gene expression and total flavonoids production in the electroporated licorice Glycyrrhiza glabra L. suspension protoplasts / P.G. Kovalenko // Біополімери і клітина. — 2004. — Т. 20, № 5. — С. 421-428. — Бібліогр.: 28 назв. — англ.
0233-7657 DOI:http://dx.doi.org/10.7124/bc.0006C5 http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/157979 575.22:581.143.6 |
|
| Language |
en
|
|
| Relation |
Біополімери і клітина
|
|
| Publisher |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
|
|